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      VHH納米抗體純化應用案例

      納米抗體(Nanobody, Nbs)是由比利時科學家于1993年在自然雜志中首次報道,是駱駝科動物(駱駝,大羊駝,羊駝及其近親物種)缺失輕鏈的天然重鏈抗體的可變區(VHH)組成的單域抗體,該抗體只包含一個重鏈可變區(VHH)和兩個常規的CH2與CH3區,VHH晶體為2.5nm,長4nm,分子量只有15KD,內部存在二硫鍵,且表面有大量親水殘基,對熱和PH值有較強的抵抗力,被稱為“生物導彈”的治療性抗體藥物。
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      簡介


        納米抗體(Nanobody, Nbs)是由比利時科學家于1993年在自然雜志中首次報道,是駱駝科動物(駱駝,大羊駝,羊駝及其近親物種)缺失輕鏈的天然重鏈抗體的可變區(VHH)組成的單域抗體,該抗體只包含一個重鏈可變區(VHH)和兩個常規的CH2與CH3區,VHH晶體為2.5nm,長4nm,分子量只有15KD,內部存在二硫鍵,且表面有大量親水殘基,對熱和PH值有較強的抵抗力,被稱為“生物導彈”的治療性抗體藥物。
        納米抗體(Nanobody)與傳統抗體相比較,在結構上存在較大差異,所以其特性也表現不一樣。納米抗體具有相對分子質量小、人源化簡單、親和力高、穩定性高、可微生物表達、免疫原性低、穿透力強、可溶性好等優勢。使其在基礎醫學研究以及疾病診斷和治療方面具有廣闊的應用前景。

       

      1

       

      純化工藝:


        與傳統的lgG相比,與駱駝發現的單鏈抗體(HCAb)缺少輕鏈和重鏈CH1,只含有CH2、CH3和可變區。HCAb抗原綁定部分由重鏈可變區構成,通過對其組裝改造,該雙特異性的納米抗體的相對分子質量為22~30 k 之間 。
        納微采用兩步離子純化方法,陰離子流穿+陽離子結合模式,最終純度達到95%以上,收率達到90%以上。

       

      結果


        經第一步NanoGel-50Q流穿模式純化后,從SDS-PAGE上分析,純度提高至80%左右,26k左右的目的條帶明顯;第二步NanoGel-50SP結合模式純化后,上下雜帶基本去除,純度提高至95%以上。

       

      注:獲得完整版信息,請聯系我們

       

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